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實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的基本原理

更新時(shí)間:2023-06-06   點(diǎn)擊次數(shù):485次

  實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)主要用于運(yùn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),通過熒光激發(fā)和采集的方式,對(duì)實(shí)驗(yàn)過程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控,將實(shí)驗(yàn)過程數(shù)據(jù)繪制成熒光曲線,實(shí)時(shí)呈現(xiàn)于儀器顯示界面,并對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合和分析,然后可生成PDF格式的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。

  對(duì)取于其他動(dòng)物體內(nèi)的生物樣本(如血液,體液等)中包含的目標(biāo)核酸,進(jìn)行快速準(zhǔn)確的定性和定量分析,同時(shí)也能夠?qū)μ厥鈽颖具M(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線,熔解曲線,基因分型等分析。

  實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的基本原理:

  實(shí)時(shí)熒光定量PCR系統(tǒng)的原理:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA擴(kuò)增,由高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)溫度循環(huán)周期,使目的基因得以迅速擴(kuò)增,具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、省時(shí)等特點(diǎn),是基因擴(kuò)增技術(shù)的一次重大革新。PCR技術(shù)可將極微量的目標(biāo)DNA特異地?cái)U(kuò)增上百萬倍,從而大大提高對(duì)DNA分子的分析和檢測(cè)能力。

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  實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入相應(yīng)的熒光染料或熒光標(biāo)記探針,在PCR反應(yīng)過程中通過熒光信號(hào)變化,對(duì)整個(gè)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè),以熒光化學(xué)物質(zhì)監(jiān)測(cè)每次聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,通過內(nèi)參或外參的方法對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析的方法。

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